重庆一中高2026届高三月考(3月)地理答案!于2026-03-08发布开考，目前已经汇总了重庆一中高2026届高三月考(3月)地理答案!的各科答案和试卷，更多试卷答案请关注本网站。
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(1)步骤①利用已构建的质粒19T-pflB，通过反向PCR获得左右同源片段，除图中已有的组分外，还应添加缓冲液（Mg2+）和 等。下表为pflB部分基因序列和设计的相关引物，可选用的引物是 （填编号）。根据不同的引物，需要重新设置PCR程序中的 。
DNA序列（虚线处省略了部分核苷酸序列）
pflB基因 5′-TCGCACACCTGACTACAATT……TCGCAATGGCAATCGGCAAACT-3′ 3′-AGCGTGTGGACTGATGTTAA……AGCGTTACCGTTAGCCGTTTGA-5'
PCR引物 ①5'ACGGGATCCTTGTAGTCAGGTGTGCGA3' ②5'ACGGGATCCTTTGCCGATTGCCATTGC3' ③5'AACTGCAGTCGCACACCTGACTACAA3' ④5'AACTGCAGGCAATGGCAATCGGCAAA3'
注：下划线标注的序列为限制酶识别序列。
(2)步骤②双酶切时，需使用的限制酶a和限制酶b分别是 和 ，影响DNA连接酶反应速率的因素有反应体系的温度、pH、酶浓度和 等。
(3)图2是质粒PNZTK-PFTF-vgb转入地衣芽孢杆菌后，将目的基因插入基因组的过程示意图。
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