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BamHⅠ G↓GATCC
PstⅠ C↓TGCAG
XhoⅠ C↓TCGAG
XbaⅠ T↓CTAGA
NheⅠ G↓CTAGC
注：Ampr为氨苄青霉素抗性基因Tert为四环素抗性基因
（1）构建基因表达载体时，需用______酶将酶切后的M1249L基因与质粒pET-28a连接起来。基因表达载体转入大肠杆菌前，可用______处理大肠杆菌，使其处于容易吸收周围环境中DNA分子的生理状态，以提高______的成功率。
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