黑龙江高三2025~2026学年度上学期九校学期初联考(26-L-013C)物理答案!于2025-09-05发布开考，目前已经汇总了黑龙江高三2025~2026学年度上学期九校学期初联考(26-L-013C)物理答案!的各科答案和试卷，更多试卷答案请关注本网站。
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③基于图4中的模板链(①)及启动子位置，判断DNA链的方向。
转录过程的发生是从启动子到终止子，转录出来的mRNA的5′端位于左侧，3′端位于右侧，由于①为模板链，其与转录产生的mRNA互补，且反向平行，所以①的方向从左至右为3′→5′，②的方向从左至右为5′→3′。
(2023·山东卷)科研人员构建了可表达J-V5融合蛋白的重组质粒并进行了检测，该质粒的部分结构如图甲所示，其中V5编码序列表达标签短肽V5。
(1)与图甲中启动子结合的酶是______________。除图甲中标出的结构外，作为载体，质粒还需具备的结构有____________________________________(答出2个结构即可)。
(2)构建重组质粒后，为了确定J基因连接到质粒中且插入方向正确，需进行PCR检测，若仅用一对引物，应选择图甲中的引物________。已知J基因转录的模板链位于b链，由此可知引物F1与图甲中J基因的________(填“a链”或“b链”)相应部分的序列相同。
(3)重组质粒在受体细胞内正确表达后，用抗J蛋白抗体和抗V5抗体分别检测相应蛋白是否表达以及表达水平，结果如图乙所示。其中，出现条带1证明细胞内表达了______________，条带2所检出的蛋白________(填“是”或“不是”)由重组质粒上的J基因表达的。
[解析] (1)基因表达载体的构建中启动子是为了启动下游基因的“表达”，表达首先需要转录，因此RNA聚合酶识别和结合的部位才是转录的起始。作为载体，质粒还需具备的结构有限制酶的切割位点、标记基因、复制原点等。(2)用PCR扩增分析法确定重组质粒中目的基因插入方向是否正确时，常设计一对引物，一个引物与目的基因序列互补，另一个引物与质粒序列互补，两引物延伸方向相反，以扩增出两引物间的序列，若插入方向正确，则可扩增出相应序列，反之，则不能扩增出相应序列，故选用的引物应为F2和R1(或F1和R2)，若选用引物F1和R1，不论目的基因插入方向是否正确，都可扩增出目的基因序列。因为J基因的b链为转录的模板链，启动子在左侧，所以转录方向为从左到右，由于转录沿模板链3′到5′端方向合成RNA，所以J基因b链左侧为3′端，引物要与DNA的3′端互补配对，所以F1与b链互补，a链也与b链互补，由此推知引物F1与a链相应部分序列相同。(3)抗J蛋白抗体和抗V5抗体均能检测到条带1，说明条带1为J-V5融合蛋白，条带2仅能由抗J蛋白抗体检测到，说明该蛋白仅含J蛋白，不含V5标签，故条带2检出的蛋白不是由重组质粒上的J基因表达的。
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