重庆好教育联盟2025-2026学年高二联考(4月)生物试题!于2026-04-16发布开考，目前已经汇总了重庆好教育联盟2025-2026学年高二联考(4月)生物试题!的各科答案和试卷，更多试卷答案请关注本网站。
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解析 (1)DNA聚合酶不能从头合成DNA,只能从引物的3'端开始延伸DNA链;根据题图可知,R1末端序列对应DNA片段和F2末端序列对应DNA片段互补,则二者能连接形成局部双链,再以两条链互为模板便可继续扩增出融合基因,能使CBF1基因与EGFP基因成功连接,因此引物R1和F2末端序列应互补。(2)根据题图信息可知,需要通过PCR过程使图中CBF1基因左端添加NcoⅠ酶识别序列,EGFP基因右端添加BstE Ⅱ酶的识别序列,图中①和⑧进行组合,融合基因左端和右端没有成功添加相关限制酶的识别序列,因此不能选择;图中⑨链式引物R1序列所在单链,从右至左为5'→3',则⑩链从左至右方向为5'→3',同理,11链从右至左方向为5'→3',12链从左至右方向为5'→3'端,因此子链延伸方向是5'端到3'端,⑩和11链相互连接后,可以以这两条长链互为模板,沿着⑩链的3'端从左至右延伸,同时沿着11的3'端从右至左延伸,两条链即可起到引物的作用,也可作为子链延伸的模板。(3)在引物F1中添加NcoⅠ的识别序列可使CBF1基因左端添加NcoⅠ识别序列,引物R2添加BstE Ⅱ识别序列,可使EGFP基因右端添加BstE Ⅱ识别序列,进而扩增形成的融合基因两端有不同的限制酶识别序列,在以融合基因为目的基因构建基因表达载体时,使用这两种限制酶处理融合基因,可产生不同的黏性末端,防止融合基因自身环化。
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